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Mass Spectrometry and 3D Modeling Indicate the SBK2 Kinase Phosphorylates Splicing Factor SRSF7 to Regulate Cardiac Development
Mark Bouska, Eduardo Callegari, Daniela Paz and Xuejun Wang
Kinases Phosphatases 2025, 3(4), 20, doi:10.3390/kinasesphosphatases3040020
该研究首次提供了体内证据,证明 SH3 结构域结合激酶家族成员 2 (SBK2) 在左心室功能中起着至关重要的作用。作者研究了在小鼠模型中恢复 SBK2 水平的效果,并采用质谱分析和 AlphaFold 结构建模技术,以鉴定其相互作用蛋白并阐明其作用机制。研究利用定量蛋白质组学,鉴定出小鼠心室中 SBK2 过表达后表达上调和下调的蛋白质。通路分析显示,SBK2 是肌动蛋白/肌球蛋白细胞骨架组织中的一个作用因子,并定位于 PTW/PP1 磷酸酶复合物。
这促使研究者进行了磷酸化富集研究(采用双重富集方法)。利用 Mascot Server 和 Distiller 软件及内置位点分析算法,对磷酸化位点进行鉴定和定位。Mascot 鉴定出 RABX5/RABGEF1 以及富含丝氨酸和精氨酸的剪接因子 7 (SRSF7) 为最显著被磷酸化的蛋白质。RABGEF1 是一种靶向线粒体的泛素结合蛋白,已知会导致严重的线粒体功能障碍;而 SRSF7 则已知调控从幼年向成年型转录组的转变。研究者将磷酸化位点数据与计算分析和建模相结合,以确定 SBK2 与 SRSF7 之间的相互作用。这引导作者提出了一种新颖的机制:SBK2 磷酸化 SRSF7,从而调控该剪接因子以促进心肌细胞发育。
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